マグネシウムは細胞内陽イオンの中でもカリウムの次に多く含まれ、DNA、RNA、ATPに関連するポリリン酸プロセスや葉緑素などのコファクターとして多くの代謝反応に必要不可欠な元素です。マグネシウム化合物は緩下剤、中和剤として、また、異常な神経刺激、血管子癇の安定性を調節する役割を果たしています。 マグネシウム濃度はMalabsortion症候群、利尿剤、アミノグリコシド治療剤、副甲状腺機能亢進症、糖尿病のアシドーシスにおいて低値を示します。尿毒症、慢性腎不全、糸球体腎炎、アディソン病、抗酸性治療では高値を示します。

本法はXyridyl Blue-I（XB-I）とマグネシウムとのキレート錯体形成による可視部の発色を観測し、マグネシウム濃度を求めます。 Xyridyl Blue-Iはアルカリ性下でマグネシウムと錯形成し、紫色を経て赤色に発色します。このMg-XB-I錯体は520nmの吸光度が増大しますが、一方、XB-I由来の600～680 nmの吸光度は減少します。 この吸光度変化を観測することによりマグネシウム濃度を求めることができます。 https://static.wixstatic.com/media/ab41e7_b59a5522a54149c5a5bf080ea2b0c13a~mv2.png

https://static.wixstatic.com/media/ab41e7_35bec0749eff41af8a41aa645b3abe4b~mv2.jpg ◯ 本キットでダイレクトに定量可能な試料 例：血清、血漿 キット中の変性剤がマグネシウムをタンパクから解離させ、発色させます。特に前処理は必要ありません。 ※EDTAを含む採血管は測定値に影響を与えるので使用しないでください。 ◯ 希釈が必要な試料 例：尿 測定範囲を超える可能性があります。2倍を目安に希釈し、測定してください。 ※蓄尿をサンプルとする場合は、塩酸添加による保存を行って下さい。測定の際はpHが2~3になるよう調整してください。 ※随時尿は成分が変動いたしますので、希釈倍率が適しない場合があります。早朝尿も同様に、希釈倍率にご注意ください。 ※検体を希釈した場合は、濃度計算時に希釈倍率のかけ忘れに注意してください。 ◯ 酸抽出の必要な試料 例：細胞ライセートや組織ホモジネート、その他液状試料 サンプルを低pHにすることでタンパクから鉄を解離させ、上清として回収し、アッセイ検体とします。 ただし、測定できるのは以下の化学種に限ります。 ・遊離マグネシウム ・タンパク結合（配位）マグネシウム（ Protein-Mg2+、 e.g アルブミン） ・その他、配位結合性マグネシウム ※EDTAを含むLysis bufferは測定値に影響を与えるので使用しないでください。 ※有機マグネシウムなどは酸分解を行って下さい。 ◯ マイクロウエーブ法及び有機物混酸分解が必要な試料 例：EDTAなどの強固なキレート剤を含む試料、有機マグネシウム（　-C-Mg-C- 単結合している場合）、環状配位子内包マグネシウムを含む試料 酸抽出では解離してこない化学種を測定する場合や、強力なマグネシウムキレート剤などの妨害物質を含むサンプルの測定に必要です。 ※各分解法で有機物を分解後、pH2 ~ 3に調整し、定容した試料をアッセイ検体としてください。

(1) DIW、標準液、アッセイ検体 3 μlを96 well plateにアプライ https://static.wixstatic.com/media/ab41e7_39e66823da0b444dbcaaf99492247ab0~mv2.jpg (2) Chelate color（発色液） 250 μlをwell添加 https://static.wixstatic.com/media/ab41e7_b82b1b4aa45c447e820cb6cafbe92bd4~mv2.jpg (3) 室温で5分間インキュベート https://static.wixstatic.com/media/ab41e7_f72f001d4cbc4403bf18c0ad3aa4bb47~mv2.jpg (4) 主波長660nmの吸光度を測定 https://static.wixstatic.com/media/ab41e7_55d55432453e41b6a3e9629d7d0364ff~mv2.jpg (5) 以下の計算式よりマグネシウム濃度を求める https://static.wixstatic.com/media/ab41e7_a9c5ba914b064680881c799f58102a4c~mv2.png

(1) 本キットによる管理血清の測定 https://static.wixstatic.com/media/ab41e7_a0ba504b48d843e7890adacd2cf6cd20~mv2.png 図1. マグネシウム濃度が既知である管理血清の測定結果

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