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※写真はイメージです
#CU03M 100 T 35,000円 (税別)
#CU04M 200 T 48,000円 (税別)
測定対象
対象サンプル
測定波長（極大波長）
測定範囲
ドキュメント
Cu2+、Cu+
血清・血漿などの
生物試料
570 ～ 590 nm (580 nm)
3 ～ 400 µg/dL
SDS
取扱説明書
・メタロアッセイ 銅 測定LSは、生物試料(血清・血漿・尿など)中の銅(Cu2+,Cu+)を
マイクロプレートリーダー(96穴ウェル)で迅速に定量することができます。
・本アッセイ原理は免疫抗体法ではなく、キレート定量法であるため、
検体の生物種に依存しません。
・血清、血漿を検体とする場合は前処理不要です。
・キット同梱の標準試料とブランク試料の２点により校正するため、多点校正は不要です。
・毒劇物を含んでいないため、取扱、廃棄時の安全性に優れています。
銅を含むタンパク質の主な役割は酸化還元機能です。現在知られている、銅を含む酵素の殆どが分子状酸素と直接反応します。プラズマ中の銅のおよそ95％はα-2-グロブリン、セルロプラスミン、フェロキシダーゼ活性を持つ酸化酵素と結合しています。銅の欠乏に関連する病気として、心臓疾患、骨粗しょう症、骨関節炎、Menkes症候群、ウイルソン病などがあります。また、生体内の抗酸化機能の低下についても報告されています。一方、過剰の銅は有毒となります。
本法は3-5 DiBr-PAESAと銅とのキレート錯体形成による可視部の呈色を観測し銅濃度を求めます。
セルロプラスミン、及びタンパク質に結合した銅を、弱酸、変性剤により解離させ、銅-3-5 DiBr-PAESA錯体を形成させます。この銅キレート錯体を波長580nmで測定することにより銅濃度を求めることができます。
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◯ 本キットでダイレクトに定量可能な試料
例：血清、血漿
キット中の変性剤が銅をタンパクから解離させ、還元剤によって還元したのち発色させます。特に前処理は必要ありません。
※EDTAを含む採血管は測定値に影響を与えるので使用しないでください。
◯ 酸抽出の必要な試料
例：細胞ライセートや組織ホモジネート、その他液状試料
サンプルを低pHにすることでタンパクから銅を解離させ、上清として回収し、アッセイ検体とします。
ただし、測定できるのは以下の化学種に限ります。
・遊離銅
・タンパク結合（配位）銅（ Protein-Cu2+ 、 e.g.アルブミン、メタロチオネイン）
・その他、配位結合性銅
※EDTAを含むLysis bufferは測定値に影響を与えるので使用しないでください。
※有機銅やヘム銅などは酸分解を行って下さい。
◯ マイクロウエーブ法及び有機物混酸分解が必要な試料
例：EDTAなどの強固なキレート剤を含む試料、有機銅（ -C-Cu-C- 単結合の場合）、環状配位子内包銅 （Cu-ポルフィリン等）を測定したい試料
酸抽出では解離してこない化学種を測定する場合や、強力な銅キレート剤などの妨害物質を含むサンプルの測定に必要です。
※各分解法で有機物を分解後、pH2 ~ 3に調整し、定容した試料をアッセイ検体としてください。
(1) DIW、標準液、アッセイ検体 12 µlを96 well plateにアプライ
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(2) 発色液 240 µlをwell添加
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(3) 室温で10分間インキュベート
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(4) 主波長580 nmの吸光度を測定
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(5) 以下の計算式より銅濃度を求める
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(1) 本キットによる管理血清の測定
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図1. 銅濃度が既知である管理血清の測定結果
(2) 本キットによるブタ肝臓中銅濃度の測定
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図2. ICP-OES法と本キットによるブタ肝臓中銅濃度測定結果
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準備中
弊社製品は以下の販売代理店よりご購入いただけます。
フナコシ 株式会社(https://www.funakoshi.co.jp)
メタロアッセイ 銅(Cu)測定 LSキット (製品紹介ページ) (https://www.cellspect.net/zn01m)
• メール：sales@funakoshi.co.jp
• 電話：03-5684-1615
• FAX：03-5684-1634
株式会社 池田理化 (http://www.ikedarika.co.jp)
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